申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細(xì)胞分盤:通過胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,歡迎咨詢上海曼博生物。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑質(zhì)量好?申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!?全球PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝幫助用戶更好地了解PEI轉(zhuǎn)染試劑的操作流程分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.
1.對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細(xì)胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,歡迎咨詢上海曼博生物。?如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!
1.對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細(xì)胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。?如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!?哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比較高?
PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強(qiáng)。PEIMAX是一種非GMP等級PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無菌試劑,采用0.1μmPES無菌過濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!轉(zhuǎn)染效率好的PEI轉(zhuǎn)染試劑是哪個品牌?天津高實(shí)用性PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝
MAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉(zhuǎn)染試劑。申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細(xì)胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請自行確定檢測時間。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!近期還可申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝!申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
本文來自石嘴山市強(qiáng)泰新型建材有限公司:http://www.grandmaraeteapotrescue.com/Article/94a57599330.html
廣州防洪閘水浮力原理
無需電力的地下建筑自動防淹利器——模塊化水動力全自動防洪閘,提供24小時的防汛保護(hù)。水動力全自動防洪閘由地面底框、可轉(zhuǎn)動擋水門扇和兩側(cè)墻端部止水橡膠軟板組成,擋水門板開閉角度隨洪水水位高低自動調(diào)整,擋 。
2023年烏克蘭碩士秋季申請已經(jīng)拉開帷幕,我們擁有龐大的服務(wù)團(tuán)隊,為每位學(xué)員提供個性化的輔導(dǎo)。我們的目標(biāo)是幫助學(xué)員順利完成學(xué)業(yè),為未來的職業(yè)發(fā)展打下堅實(shí)的基礎(chǔ)?;o大學(xué)的經(jīng)濟(jì)學(xué)碩士課程是一個免考研的申 。
制造過程與質(zhì)量控制軸承配件鈑金的制造過程應(yīng)嚴(yán)格控制每個環(huán)節(jié)的質(zhì)量,包括材料檢驗(yàn)、加工工藝審查、半成品檢驗(yàn)、成品檢驗(yàn)等環(huán)節(jié)。在制造過程中,應(yīng)采用先進(jìn)的檢測設(shè)備和檢測方法,如無損檢測、理化試驗(yàn)等,以確保零 。
3)如出現(xiàn)工件表面拉毛現(xiàn)象,說明冷卻液不干凈或砂輪表面有浮砂,應(yīng)重新過濾冷卻液或刷掉砂輪表面浮砂。4)如出現(xiàn)工件局部燒傷現(xiàn)象,可能是冷卻液不充分或進(jìn)給量過大,或砂輪鈍化等原因所致。5)如加工后的工件表 。
不管您是小白還是想轉(zhuǎn)行開店的人員都可以加入,無門檻要求,總部372度各個方面的扶持,選址布局、培訓(xùn)、設(shè)備、總部賦能,讓你全程無憂,我們還會給到加盟商開店支持,幫助選址、幫助門店裝修設(shè)計、進(jìn)行培訓(xùn)、到店 。
鋰電設(shè)備機(jī)電安裝調(diào)試的流程一般包括以下幾個步驟:1.設(shè)備安裝:根據(jù)設(shè)備的安裝說明書,將設(shè)備安裝在指定的位置,并進(jìn)行固定和連接。2.電氣接線:根據(jù)電氣接線圖,將設(shè)備的電氣線路連接好,并進(jìn)行絕緣測試。3. 。
惠州大良谷生態(tài)園美食盛宴——品味地道農(nóng)家風(fēng)味在惠州汝湖大良谷生態(tài)園內(nèi)。我們?yōu)槟峁┝艘幌盗械霓r(nóng)家美食。這些美食選用當(dāng)?shù)鼐G色、有機(jī)的食材,經(jīng)過精心烹飪,讓您品嘗到地道的農(nóng)家風(fēng)味。同時,我們還為您安排了自 。
智能雨水收集系統(tǒng)是一種新型的環(huán)保設(shè)備,它可以收集雨水并將其用于灌溉、洗車、清洗等用途。這種系統(tǒng)不僅可以節(jié)約水資源,還可以減少排放,對環(huán)境保護(hù)起到了積極的作用。智能雨水收集系統(tǒng)的使用體驗(yàn)非常好,用戶可以 。
做三維動畫的優(yōu)勢:可視化效果:三維動畫能夠以逼真的方式呈現(xiàn)物體、場景和角色。通過使用高級渲染技術(shù)和光影效果,可以創(chuàng)建出令人驚嘆的視覺效果,使觀眾沉浸在虛擬的世界中;創(chuàng)造力和自由度:三維動畫提供了無限的 。
LIYY-TP CE認(rèn)證PVC護(hù)套柔性對絞數(shù)據(jù)電纜在當(dāng)今數(shù)字化時代,數(shù)據(jù)傳輸變得越來越重要和普遍。為了滿足不同場景下的數(shù)據(jù)傳輸需求,數(shù)據(jù)電纜的應(yīng)用也得到了普片的發(fā)展和應(yīng)用。其中,柔性對絞數(shù)據(jù)電纜因其的 。
鹿鞭的儲存環(huán)境應(yīng)該是干燥通風(fēng)的地方。潮濕的環(huán)境會導(dǎo)致鹿鞭受潮發(fā)霉,從而降低其藥效。因此,儲存鹿鞭的地方應(yīng)該保持干燥,并且要有良好的通風(fēng),避免濕氣滯留。此外,鹿鞭應(yīng)該遠(yuǎn)離陽光直射,以免日曬導(dǎo)致其變質(zhì)。鹿 。